鼠尾胶原制备详细步骤 1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟； 2.将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段，抽出银色的尾键 3、将尾腱剪断置于平皿中，PBS浸泡； 4、将所有的尾键放于Tris-HCl中，4度过夜。 0.05mol/L Tris-bas的Tris-HCl的配制方法。 称量6gTris置于1L烧杯中，加入约800ml去离子水，充分搅拌溶解，浓盐酸调节PH，高压灭菌。 5、吸去Tris-HCl，将尾腱称重（0.5-1克）； 6、将尾腱置于平皿内剪碎，转移至三角烧瓶中； 7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液； 8、摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期； 9、离心，4度4000转/分，30分钟； 10、吸取上清，过300目滤器。
11、每600ml上述粗提液中加入100ml 0.14 mol/LNaOH，8000转5min离心，弃上清，留絮状沉淀。 12、将絮状沉淀物置于三蒸水中，用
0.1mol/L（1000:6）醋酸溶解沉淀物。
自制方法：
| 250g白鼠一只，从尾根部切断鼠尾，洗净血渍，75%酒精浸泡30min，剔毛，无菌条件下切成1.5cm的小段，抽出尾腱置于平皿，剪碎，浸入120ml灭菌0.2M醋酸中，置4℃冰箱，间或摇动，48h后移入50ml离心管中，以4000r∕min离心30min，吸取上清液，10磅10min高压灭菌，分装，-20℃保存即可。实验室就是这样制备鼠尾胶原的，效果不错，你可以试试看。没有用10% NaCI溶液盐析，也没有问题，比较简单。 另附0.2M醋酸配制：120ml灭菌ddH20 冰醋酸 0.06mol |