细胞色素氧化酶染色液说明书

原理：细胞色素氧化酶（Cytochrome Oxidase,CO）被认为是线粒体固有的酶，在含有大量线粒体的细胞（如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞）内都具有高度活性。此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标，亦可以作为线粒体的标志酶之一。

细胞色素氧化酶染色液（联苯胺法）染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺（DAB）使其侧链的氨基氧化，进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine聚合物。此酶对固定剂敏感，故须用新鲜切片。

产品组成：

自备材料：1、恒温培养箱

2、光学显微镜

操作步骤（仅供参考）：

1、冷冻切片，厚6μm，不固定。

2、滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。

3、切片入DAB孵育液中，37℃避光孵育45-60min。

4、移去切片上的染色液，滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。

5、蒸馏水稍洗3-5s。

6、（可选）滴加propbs苏木素染色液浅染细胞核3-5min。

7、流水冲洗10min。

8、常规脱蜡透明，中性树胶封闭。

染色结果：CO酶活性部位：棕色；

心肌、肾小管上皮内颗粒（线粒体）：蓝色

阴性对照（可选）：

取新鲜配制好的DAB孵育液，按DAB孵育液：CO对照液=50:1的比例混合，即为CO对照工作液，相同切片入CO对照工作液，室温孵育30-60min，其余同上，呈阴性反应。

注意事项：1、本染色液适用于冷冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。

2、CO孵育液孵育时间因组织而异，心肌、肾孵育约20-30min，肝脏约50-60min，甲状腺滤泡上皮约2h。

3、为了您的健康和安全，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

有效期：6个月。

*仅供科研使用，不能应用于人体。*

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